Algoritm pentru determinarea termenului preconizat de scadență și a perioadei concediului prenatal. Determinarea proteinei (metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov unificată)
Se obișnuiește să se distingă următoarele forme de proteinurie în funcție de locul de apariție: prerenală, asociată cu descompunerea crescută a proteinelor tisulare, hemoliză severă; renală, cauzată de patologia renală, care poate fi împărțită în glomerulară și tubulară; postrenal, asociat cu patologia tractului urinar și cel mai adesea cauzat de exsudația inflamatorie.
În funcție de durata existenței, se distinge proteinurie constantă, existentă de multe săptămâni și chiar ani, și tranzitorie, apărând periodic, uneori chiar și în absența patologiei renale, de exemplu, cu febră și intoxicație severă. Este recomandabil să se facă distincția între variabilitatea proteinuriei: cu o pierdere zilnică de proteine de până la 1 g - moderată, de la 1 la 3 g - moderată și mai mult de 3 g - severă.
Detectarea proteinelor cu o greutate moleculară relativ mare în urină indică o lipsă de selectivitate a filtrului renal și deteriorarea severă a acestuia. În aceste cazuri, se vorbește de selectivitate scăzută a proteinuriei. Prin urmare, determinarea fracțiilor proteice din urină este acum larg răspândită. Cele mai precise metode sunt electroforeza pe gel de amidon și poliacrilamidă.
Pe baza rezultatelor obținute prin aceste metode, se poate aprecia selectivitatea proteinuriei.
Cele mai multe metode calitative și cantitative de determinare a proteinei în urină se bazează pe coagularea acesteia în volumul de urină sau la interfața mediilor (urină și acid); dacă există o modalitate de a măsura intensitatea coagulării, atunci proba devine cantitativă.
Test unificat cu acid sulfosalicilic:
Reactiv necesar:
Soluție 20% de acid sulfosalicilic.Progresul studiului:
3 ml de urină filtrată se toarnă în 2 eprubete. În eprubetă se adaugă 6-8 picături de reactiv. Pe un fundal întunecat, tubul de control este comparat cu eprubeta. Turbiditatea în eprubetă indică prezența proteinei, proba este considerată pozitivă.Dacă reacția urinei este alcalină, atunci înainte de studiu se acidifică cu 2-3 picături dintr-o soluție 10% de acid acetic.
Metoda unificată Brandberg-Roberts-Stolnikov:
Metoda se bazează pe testul inel Heller, care constă în faptul că la limita acidului azotic și urinei, în prezența proteinei, se coagulează și apare un inel alb.Reactiv necesar:
Soluție de acid azotic 30% (densitate relativă 1,2) sau reactiv Larionova.Prepararea reactivului Larionova: 20-30 g de clorură de sodiu se dizolvă în 100 ml apă distilată la încălzire, se lasă să se răcească și se filtrează. La 99 ml de filtrat se adaugă 1 ml de acid azotic concentrat.
Progresul studiului:
Într-o eprubetă se toarnă 1-2 ml de acid azotic (sau reactiv Larionova) și aceeași cantitate de urină filtrată este stratificată cu grijă de-a lungul peretelui eprubetei. Apariția unui inel alb subțire la interfața celor două lichide între minutele 2 și 3 indică prezența proteinei la o concentrație de aproximativ 0,033 g/l. Dacă inelul apare mai devreme de 2 minute după stratificare, urina trebuie diluată cu apă și urina deja diluată trebuie stratificată din nou. Gradul de diluare a urinei este selectat în funcție de tipul de inel, adică. lățimea, compactitatea și timpul de apariție. Dacă un inel sub formă de fir apare înainte de 2 minute, urina este diluată de 2 ori, dacă este lată - de 4 ori, dacă este compactă - de 8 ori etc. Concentrația de proteine se calculează prin înmulțirea cu 0,033 cu gradul de diluție și se exprimă în grame la 1 litru (g/l).Uneori se obține un inel alb în prezența unor cantități mari de urati. Spre deosebire de inelul proteic, inelul de urat apare ușor deasupra limitei dintre cele două lichide și se dizolvă la încălzire ușoară.
Determinarea cantitativă a proteinei în urină prin turbiditatea formată prin adăugarea de acid sulfosalicilic:
Principiul metodei:
Intensitatea turbidității în timpul coagulării proteinelor cu acid sulfosalicilic este proporțională cu concentrația acestuia.Reactivi necesari:
1. Soluție 3% de acid sulfosalicilic.2. Soluție de clorură de sodiu 0,9%.
3. Soluție standard de albumină - soluție 1% (soluție 1 ml care conține 10 mg albumină): 1 g albumină liofilizată (din ser uman sau bovin) se dizolvă într-o cantitate mică de soluție de clorură de sodiu 0,9% într-un balon cu capacitate de 100 ml, și apoi se diluează până la semn cu aceeași soluție. Reactivul este stabilizat prin adăugarea a 1 ml de soluție de azidă de sodiu 5% (NaN3). Când este păstrat la frigider, reactivul este bun timp de 2 luni.
Echipament special - colorimetru fotoelectric.
Progresul studiului:
Se adaugă 1,25 ml de urină filtrată într-o eprubetă, se adaugă la 5 ml cu o soluție de acid sulfosalicilic 3% și se amestecă. După 5 minute, acestea sunt măsurate pe un fotoelectrocolorimetru la o lungime de undă de 590-650 nm (filtru portocaliu sau roșu) față de un control într-o cuvă cu o lungime a căii optice de 5 mm. Martorul este o eprubetă în care sa adăugat soluție de clorură de sodiu 0,9% la 1,25 ml de urină filtrată la 5 ml. Calculul se efectuează conform graficului de calibrare, pentru construcția căruia se prepară diluții din soluția standard, așa cum este indicat în tabel.Din fiecare soluție obținută se prelevează 1,25 ml și se prelucrează ca probe experimentale.
Dependența liniară la construirea unui grafic de calibrare este menținută până la 1 g/l. La concentrații mai mari, proba trebuie diluată, iar diluția trebuie luată în considerare la calcul.
Rezultate fals pozitive pot fi obținute dacă în urină sunt prezenți agenți de contrast care conțin iod organic. Prin urmare, testul nu poate fi utilizat la persoanele care iau suplimente de iod; Un rezultat fals pozitiv se poate datora și utilizării de medicamente sulfa, doze mari de penicilină și concentrații mari de acid uric în urină.
Metoda biuretului:
Principiul metodei:
Legăturile peptidice ale proteinei cu sărurile de cupru în alcalin formează un complex violet. Proteinele sunt precipitate cu acid tricloracetic.Reactivi necesari:
1. Soluție 10% de acid tricloracetic.2. Soluție de cupru 20% (CuSO4∙5H2O).
3. Soluție NaOH 3%.
Progresul studiului:
La 5 ml de urină prelevați din cantitatea zilnică, se adaugă 3 ml de soluție de acid tricloracetic și se centrifughează la un volum constant de sediment. Supernatantul este aspirat cu o pipetă, apoi precipitatul este dizolvat în 5 ml soluție de NaOH. La soluție se adaugă 0,25 ml de CuS04, amestecul este agitat și centrifugat. Lichidul supernatant este fotometrul la o lungime de undă de 540 nm într-o cuvă cu o lungime a căii optice de 10 mm față de apă distilată. Concentrația de proteine este calculată folosind o curbă de calibrare, la construirea acesteia, concentrația de proteine (g/l) este reprezentată pe axa ordonatelor, iar densitatea optică în unități de extincție este reprezentată pe axa absciselor. Pe baza concentrației obținute se calculează pierderea zilnică de proteine în urină.Folosind hârtie indicatoare (benzi):
Proteinele pot fi detectate folosind hârtie indicatoare (benzi), care sunt produse de Albuphan, Ames (Anglia), Albustix, Boehringer (Germania), Comburtest etc.Principiul se bazează pe fenomenul așa-numitei erori proteice a unor indicatori acido-bazici. Partea indicatoare a hârtiei este impregnată cu albastru de tetrabromofenol și tampon citrat. Când hârtia este umezită, tamponul se dizolvă și oferă pH-ul adecvat pentru reacția indicatorului.
La 3,0-3,5, grupele amino ale proteinelor reacţionează cu indicatorul şi îşi schimbă culoarea iniţială galbenă în verzui-albastru, după care, comparând cu o scară de culori, se poate estima aproximativ concentraţia de proteine din urina testată. Principala condiție prealabilă pentru funcționarea corectă a benzilor de testare este asigurarea unui pH în intervalul 3,0-3,5 pentru ca reacția să aibă loc.
Dacă hârtia este în contact cu urina testată mai mult decât expunerea specificată în instrucțiuni, atunci tamponul citrat se dizolvă în ea, iar apoi indicatorul reacţionează la pH-ul real al urinei, adică. dă o reacție fals pozitivă. Datorită faptului că capacitatea tampon este limitată, chiar dacă sunt respectate recomandările, se obțin rezultate fals pozitive în probele de urină prea alcalină (pH > 6,5) și în probele de urină prea acidă (pH).
Numărul de grupări amino care reacţionează în compoziţia proteinelor individuale este diferit, astfel încât albuminele reacţionează de 2 ori mai intens decât aceeaşi cantitate de γ-globuline (proteina Bence-Jones, paraproteine) şi mult mai intens decât glicoproteinele. Cu toate acestea, dacă există o cantitate mare de mucus cu un conținut ridicat de glicoproteine (cu inflamație a tractului urinar), fulgii de mucus care se depun pe banda indicatoare pot da rezultate fals pozitive.
Sensibilitatea loturilor individuale de producție de hârtie indicator, precum și a tipurilor individuale de hârtie produse de aceeași companie, poate varia, astfel încât cuantificarea proteinelor prin această metodă trebuie tratată cu prudență. Determinarea pierderii zilnice de proteine în urină cu ajutorul hârtiei indicator este imposibilă. Astfel, hârtia indicator este inferioară testelor chimice, în primul rând testului cu acid sulfosalicilic, deși face posibilă studierea rapidă a unei serii de probe.
Detectarea proteinei Bence Jones în urină:
Proteina Bence-Jones poate fi excretată prin urină în caz de mielom, macroglobulinemie Waldenström.Este recomandabil să se efectueze studiul numai dacă testul cu acid sulfosalicilic este pozitiv. Hârtia indicatoare nu este potrivită pentru detectarea proteinei Bence Jones.
Principiu:
Pe baza reacției de termoprecipitare. Metodele care evaluează dizolvarea proteinei Bence-Jones la o temperatură de 100 °C sau re-precipitarea la răcirea ulterioară sunt nesigure, deoarece nu toate corpurile proteice Bence-Jones au proprietățile corespunzătoare. Cea mai sigură detecție a acestei paraproteine este precipitarea ei la o temperatură de 40-60 ° C, dar chiar și în aceste condiții este posibil să nu apară precipitații în urina prea acidă (pH 6,5), la o densitate relativă scăzută a urinei și la o concentrație scăzută de proteină Bence Jones.Reactivi necesari:
Tampon acetat 2 M pH 4,9.Progresul studiului:
Urina filtrată în cantitate de 4 ml se amestecă cu 1 ml de tampon și se încălzește timp de 15 minute într-o baie de apă la o temperatură de 56 °C. În prezența proteinelor Bence-Jones, în 2 minute apare un precipitat pronunțat; dacă concentrația proteinei Bence-Jones este mai mică de 3 g/l, proba se poate dovedi negativă. În practică, acest lucru este extrem de rar, deoarece în cea mai mare parte concentrația de proteină Bence Jones în urină este semnificativă.Cu deplină certitudine, proteina Bence Jones poate fi detectată prin cercetări imunoelectroforetice folosind seruri specifice împotriva lanțurilor grele și ușoare ale imunoglobulinelor.
Definiția albumozei (proteozei):
Albumozele sunt produse ale descompunerii proteinelor, al căror principiu de determinare se bazează pe faptul că nu se coagulează când sunt fierte, ci dau o reacție pozitivă a biuretului și sunt sărate cu anumite săruri, în special sulfat de amoniu și acetat de zinc într-un mediu acid.Urina normală nu conține albumoză. Urmele pot fi în urina normală dacă există un amestec de lichid seminal. În patologie, albumozele pot apărea în urină în timpul afecțiunilor febrile, transfuzii de sânge și plasmă, resorbție de exsudate și transudate și dezintegrare a tumorilor.
Reactivi necesari:
1. Soluție saturată de clorură de sodiu.2. Soluție concentrată de hidroxid de sodiu.
3. O soluție slabă de sulfat de cupru (aproape incoloră).
Progresul studiului:
O soluție saturată de clorură de sodiu (1/3 volum) se adaugă la urina acidulată cu acid acetic, se fierbe, iar lichidul fierbinte este filtrat. Albumozele trec în filtrat, în care prezența lor este determinată de reacția biuretului. La filtrat se adaugă 1/2 volum dintr-o soluție concentrată de hidroxid de sodiu și câteva picături dintr-o soluție slabă de sulfat de cupru. Un test pozitiv are ca rezultat o culoare roșu-violet.Dacă testul cu acid sulfosalicilic este pozitiv, urina este încălzită. Dacă turbiditatea dispare și reapare la răcire, asta înseamnă că urina conține albumoză sau corp proteic Bence-Jones.
Cantități mici de proteine se găsesc în urina de 24 de ore la persoanele sănătoase. Cu toate acestea, astfel de concentrații mici nu pot fi detectate folosind metode de cercetare convenționale. Eliberarea de cantități mai mari de proteine, la care testele calitative obișnuite pentru proteine în urină devin pozitive, se numește proteinurie. Există proteinurie renală (adevărată) și extrarenală (falsă). În cazul proteinuriei renale, proteinele intră în urină direct din sânge datorită filtrării crescute de către glomerulii rinichilor sau scăderii reabsorbției tubulare.
Proteinurie renală (adevărată).
Proteinuria renală (adevărată) poate fi funcțională sau organică. Dintre proteinuria renală funcțională, se observă cel mai adesea următoarele tipuri:Proteinuria fiziologică a nou-născuților, care dispare în a 4-a până la a 10-a zi după naștere, iar la prematuri ceva mai târziu;
- albuminuria ortostatică, care este tipică copiilor cu vârsta cuprinsă între 7-18 ani și apare doar în poziție verticală a corpului;
- albuminurie tranzitorie (accident vascular cerebral), a cărei cauză pot fi diverse boli ale sistemului digestiv, anemie severă, arsuri, leziuni sau factori fiziologici: activitate fizică grea, hipotermie, emoții puternice, alimente abundente, bogate în proteine etc.
Proteinuria organică (renală) se observă din cauza trecerii proteinelor din sânge prin zonele deteriorate ale endoteliului glomerulilor renali în boli renale (glomerulonefrită, nefroză, nefroscleroză, amiloidoză, nefropatie a gravidelor), tulburări ale hemodinamicii renale (renală). hipertensiune venoasă, hipoxie), efecte trofice și toxice (inclusiv medicinale) asupra pereților capilarelor glomerulare.
proteinurie extrarenală (falsă).
Proteinurie extrarenală (falsă), în care sursa de proteine din urină este un amestec de leucocite, eritrocite, bacterii și celule uroteliale. observată în boli urologice (urolitiază, tuberculoză renală, tumori renale și urinare etc.).Determinarea proteinelor în urină
Cele mai multe metode calitative și cantitative de determinare a proteinei în urină se bazează pe coagularea acesteia în volumul de urină sau la interfața mediilor (urină și acid).Dintre metodele calitative de determinare a bek în urină, cele mai utilizate sunt testul unificat cu acid sulfosalicilic și testul inel Heller.
Un test standardizat cu acid sulfasalicilic se efectuează după cum urmează. 3 ml de urină filtrată se toarnă în 2 eprubete. La unul dintre ele se adaugă 6-8 picături dintr-o soluție de acid sulfasalicilic 20%. Ambele eprubete sunt comparate pe un fundal întunecat. Urina tulbure dintr-o eprubetă care conține acid sulfasalicilic indică prezența proteinelor. Înainte de studiu, este necesar să se determine reacția urinei, iar dacă este alcalină, apoi se acidulează cu 2-3 picături dintr-o soluție de acid acetic 10%.
Testul Heller se bazează pe faptul că, în prezența proteinelor în urină, coagularea are loc la granița acidului azotic și a urinei și apare un inel alb. Într-o eprubetă se toarnă 1-2 ml dintr-o soluție de acid azotic 30% și exact aceeași cantitate de urină filtrată este stratificată cu grijă de-a lungul peretelui eprubetei. Apariția unui inel alb la marginea a două lichide indică prezența proteinelor în urină. Trebuie amintit că uneori se formează un inel alb în prezența unei cantități mari de urati, dar, spre deosebire de inelul proteic, acesta apare puțin deasupra limitei dintre două lichide și se dizolvă atunci când este încălzit [Pletneva N.G., 1987].
Cele mai frecvent utilizate metode cantitative sunt:
1) metoda unificată Brandberg-Roberts-Stolnikov, care se bazează pe testul inel Heller;
2) metoda fotoelectrocolorimetrică pentru determinarea cantitativă a proteinei în urină prin turbiditatea formată prin adăugarea de acid sulfasalicilic;
3) metoda biuretului.
Detectarea proteinei în urină, folosind o metodă simplificată, accelerată, se realizează folosind o metodă colorimetrică folosind hârtie indicator produsă de Lachema (Slovacia), Albuphan, Ames (Anglia), Albustix, Boehringer (Germania), Comburtest etc. Metoda constă în scufundare. o bandă specială de hârtie înmuiată în albastru de tetrabromofenol și tampon citrat în urină, care își schimbă culoarea de la galben la albastru în funcție de conținutul de proteine din urină. Concentrația aproximativă de proteine din urina de testat este determinată folosind o scară standard. Pentru a obține rezultate corecte, trebuie îndeplinite următoarele condiții. pH-ul urinei trebuie să fie în intervalul 3,0-3,5; urina care este prea alcalină (pH 6,5) va avea ca rezultat un fals pozitiv, iar urina prea acidă (pH 3,0) va avea ca rezultat un fals negativ.
Hârtia trebuie să fie în contact cu urina testată nu mai mult decât este indicat în instrucțiuni, altfel testul va da o reacție fals pozitivă. Acesta din urmă se observă și atunci când există o cantitate mare de mucus în urină. Sensibilitatea diferitelor tipuri și loturi de hârtie poate varia, astfel încât cuantificarea proteinelor din urină prin această metodă trebuie tratată cu prudență. Determinarea cantității sale în urină zilnică folosind hârtie indicatoare este imposibilă [Pletneva N.G., 1987]
Determinarea proteinuriei zilnice
Există mai multe moduri de a determina cantitatea de proteine excretată în urină pe zi. Cea mai simplă este metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov.Metodologie. Se toarnă 5-10 ml de urină zilnic bine amestecată într-o eprubetă și se adaugă cu grijă de-a lungul pereților acesteia o soluție de acid azotic 30%. Dacă în urină există proteine în cantitate de 0,033% (adică 33 mg per 1 litru de urină), după 2-3 minute apare un inel alb subțire, dar clar vizibil. La o concentrație mai mică, proba este negativă. Dacă în urină există un conținut mai mare de proteine, cantitatea acesteia este determinată prin diluții repetate ale urinei cu apă distilată până când un inel încetează să se formeze. În ultima eprubetă, în care inelul este încă vizibil, concentrația de proteine va fi de 0,033%. Prin înmulțirea cu 0,033 cu gradul de diluare a urinei, se determină conținutul de proteine în 1 litru de urină nediluată în grame. Apoi, conținutul de proteine din urina zilnică este calculat folosind formula:
K=(x V)/1000
Unde K este cantitatea de proteine din urina zilnică (g); x - cantitatea de proteine în 1 litru de urină (g); V este cantitatea de urină excretată pe zi (ml).
În mod normal, de la 27 la 150 mg (în medie 40-80 mg) de proteine sunt excretate prin urină în timpul zilei.
Acest test vă permite să determinați numai proteine fin dispersate (albumină) în urină. Metodele cantitative mai precise (metoda colorimetrică a lui Kjeldahl etc.) sunt destul de complexe și necesită echipamente speciale.
Cu proteinuria renală, nu numai albumina, ci și alte tipuri de proteine sunt excretate în urină. O proteinogramă normală (conform Seitz et al., 1953) are următorul procent: albumină - 20%, α 1 -globuline - 12%, α 2 -globuline - 17%, γ-globuline - 43% și β-globuline - 8%. Raportul dintre albumine și globuline se modifică în diferite boli de rinichi, de exemplu. relația cantitativă dintre fracțiile proteice este perturbată.
Cele mai obișnuite metode de fracționare a uroproteinelor sunt următoarele: sărare cu săruri neutre, fracționare electroforetică, metode imunologice (reacție de imunodifuzie radială Mancini, analiză imunoelectroforetică, imunoelectroforeză de precipitare), cromatografia, filtrare pe gel și ultracentrifugare.
În legătură cu introducerea metodelor de fracționare a uroproteinelor bazate pe studiul mobilității electroforetice, variabilitatea greutății moleculare, mărimea și forma moleculelor de uroproteine, a devenit posibilă identificarea tipurilor de proteinurie caracteristice unei anumite boli și studierea clearance-urilor plasmatice individuale. proteine. Până în prezent, peste 40 de proteine plasmatice au fost identificate în urină, inclusiv 31 de proteine plasmatice în urină normală.
proteinurie selectivă
În ultimii ani, a apărut conceptul de selectivitate a proteinuriei. În 1955, Hardwicke și Squire au formulat conceptul de proteinurie „selectivă” și „neselectivă”, determinând că filtrarea proteinelor plasmatice în urină urmează un anumit model: cu cât greutatea moleculară a proteinei excretate în urină este mai mare, cu atât mai putin clearance-ul acestuia si cu cat concentratia sa in urina este mai mica.urina finala. Proteinuria corespunzătoare acestui model este selectivă, spre deosebire de proteinuria neselectivă, care se caracterizează printr-o perversiune a modelului derivat.Detectarea proteinelor cu o greutate moleculară relativ mare în urină indică o lipsă de selectivitate a filtrului renal și deteriorarea severă a acestuia. În aceste cazuri, se vorbește de selectivitate scăzută a proteinuriei. Prin urmare, determinarea fracțiilor proteice din urină folosind metode de electroforeză pe gel de amidon și poliacrilamidă este acum larg răspândită. Pe baza rezultatelor acestor metode de cercetare, se poate judeca selectivitatea proteinuriei.
Potrivit lui V.S. Makhlina (1975), cel mai justificat este de a determina selectivitatea proteinuriei prin compararea clearance-urilor a 6-7 proteine individuale din plasma sanguină (albumină, traneferină, α 2 - macroglobulină, IgA, IgG, IgM) utilizând precise și specifice metode imunologice cantitative de reacție de imunodifuzie radială conform lui Mancini, analiză imunoelectroforetică și imunoelectroforeză precipitată. Gradul de selectivitate al proteinuriei este determinat de indicele de selectivitate, care este raportul dintre proteinele comparate și de referință (albumină).
Studierea clearance-urilor proteinelor plasmatice individuale ne permite să obținem informații fiabile despre starea membranelor bazale de filtrare ale glomerulilor rinichilor. Legătura dintre natura proteinelor excretate prin urină și modificările membranelor bazale glomerulare este atât de pronunțată și constantă, încât uroproteinograma poate judeca indirect modificările patofiziologice ale glomerulii rinichilor. În mod normal, dimensiunea medie a porilor membranei bazale glomerulare este de 2,9-4 A° NM, ceea ce poate permite trecerea proteinelor cu o greutate moleculară de până la 10 4 (mioglobulină, α 1 acidă - glicoproteină, lanțuri ușoare de imunoglobuline, Fc și fragmente Fab de IgG, albumină și transferină).
Cu glomerulonefrita și sindromul nefrotic, dimensiunea porilor din membranele bazale ale glomerulilor crește și, prin urmare, membrana bazală devine permeabilă la moleculele proteice de dimensiune și masă mari (ceruloplasmină, haptoglobină, IgG, IgA etc.). Cu afectarea extremă a glomerulilor rinichilor, în urină apar molecule gigantice de proteine din plasma sanguină (α 2 -macroglobulină, IgM și β 2 -lipoproteină).
Prin determinarea spectrului proteic al urinei, putem concluziona că sunt afectate predominant anumite zone ale nefronului. Glomerulonefrita cu afectare predominantă a membranelor bazale glomerulare se caracterizează prin prezența proteinelor cu greutate moleculară mare și medie în urină. Pielonefrita cu afectare predominantă a membranelor bazale ale tubilor se caracterizează prin absența proteinelor cu moleculară mare și prezența unor cantități crescute de proteine moleculare medii și joase.
β2-Microglobulina
Pe lângă proteinele binecunoscute precum albumina, imunoglobulinele, lipoproteinele. fibrinogenul, transferrina, urina contine microproteine plasmatice, printre care de interes clinic prezinta β 2 -microglobulina, descoperita de Berggard si Bearn in 1968. Avand o greutate moleculara mica (greutate moleculara relativa 1800), trece liber prin glomerulii rinichi şi aproape complet reabsorbite în tubii proximali. Acest lucru permite determinarea cantitativă a β2-microglobulinei în sânge și urină pentru a determina rata de filtrare glomerulară și capacitatea rinichilor de a resorbi proteinele în tubii proximali.Concentrația acestei proteine în plasma sanguină și urină este determinată prin metoda radioimunologică folosind trusa standard „Phade-bas β 2 -mikroiest” (Pharmacia, Suedia). Serul sanguin al persoanelor sănătoase conține în medie 1,7 mg/l (variază de la 0,6 la 3 mg/l), iar urina conține în medie 81 μg/l (maximum 250 μg/l) de β2-microglobulină. Depășirea lui în urină peste 1000 mcg/l este un fenomen patologic. Conținutul de β2-microglobuline din sânge crește în bolile însoțite de filtrarea glomerulară afectată, în special în glomerulonefrita acută și cronică, boala polichistică a rinichilor, nefroscleroza, nefropatia diabetică, insuficiența renală acută.
Concentrația de β 2 -microglobuline în urină crește în bolile însoțite de afectarea funcției de reabsorbție a tubulilor, ceea ce duce la o creștere a excreției sale în urină de 10-50 de ori, în special cu pielonefrită, insuficiență renală cronică, purulentă. intoxicație, etc. Este caracteristic că cu cistita în Spre deosebire de pielonefrită, nu există o creștere a concentrației de β 2 -microglobuline în urină, care poate fi utilizată pentru diagnosticul diferențial al acestor boli. Cu toate acestea, atunci când se interpretează rezultatele studiului, trebuie să se țină seama de faptul că orice creștere a temperaturii este întotdeauna însoțită de o creștere a excreției de β2-microglobuline în urină.
Molecule medii de sânge și urină
Moleculele medii (MM), denumite altfel toxine proteice, sunt substanțe cu o greutate moleculară de 500-5000 daltoni. Structura lor fizică este necunoscută. Compoziția SM include cel puțin 30 de peptide: oxitocină, vasopresină, angiotensină, glucagon, hormon adrenocorticotrop (ACTH) etc. Se observă acumularea excesivă de SM cu o scădere a funcției renale și o cantitate mare de proteine deformate și metaboliții acestora în sânge. Au un efect biologic divers și sunt neurotoxice, provoacă imunosupresie secundară, anemie secundară, inhibă biosinteza proteinelor și eritropoieza, inhibă activitatea multor enzime și perturbă fazele procesului inflamator.Nivelul SM în sânge și urină este determinat printr-un test de screening, precum și prin spectrofotometrie în zona ultravioletă la lungimi de undă de 254 și 280 mm pe un spectrofotometru DI-8B, precum și prin spectrofotometrie dinamică cu procesare computerizată în intervalul de lungimi de undă 220-335 nm pe același spectrometru de la Beckman. Conținutul de SM din sânge este luat ca normă egal cu 0,24 ± 0,02 arb. unități, iar în urină - 0,312 ± 0,09 arb. unitati
Fiind deșeuri normale ale organismului, acestea sunt în mod normal îndepărtate din acesta noaptea prin filtrare glomerulară cu 0,5%; 5% dintre ele sunt eliminate în alte moduri. Toate fracțiile SM suferă reabsorbție tubulară.
Uroproteine non-plasmatice (tisulare).
În plus față de proteinele plasmatice din sânge, în urină pot exista proteine non-plasmatice (țesuturi). Potrivit lui Buxbaum și Franklin (1970), proteinele non-plasmatice reprezintă aproximativ 2/3 din toți biocoloizii din urină și o parte semnificativă a uroproteinelor în proteinuria patologică. Proteinele tisulare intră în urină direct din rinichi sau din organele asociate anatomic cu tractul urinar, sau pătrund în sânge din alte organe și țesuturi, iar din acesta prin membranele bazale ale glomerulilor rinichiului în urină. În acest din urmă caz, excreția proteinelor tisulare în urină are loc în mod similar cu excreția proteinelor plasmatice de diferite greutăți moleculare. Compoziția uroproteinelor non-plasmatice este extrem de diversă. Printre acestea se numără glicoproteinele, hormonii, antigenele, enzimele.Proteinele tisulare din urină sunt detectate folosind metode convenționale de chimie a proteinelor (ultracentrifugarea, cromatografie pe gel, diferite tipuri de electroforeză), reacții specifice la enzime și hormoni și metode imunologice. Acestea din urmă permit, de asemenea, determinarea concentrației uroproteinei non-plasmatice în urină și, în unele cazuri, determinarea structurilor tisulare care au devenit sursa apariției sale. Principala metodă de detectare a proteinelor non-plasmatice în urină este analiza de imunodifuzie cu antiser obținut prin imunizarea animalelor de experiment cu urină umană și ulterior epuizat (adsorbit) de proteinele plasmatice ale sângelui.
Studiul enzimelor din sânge și urină
În timpul procesului patologic, se observă tulburări profunde ale funcțiilor vitale ale celulelor, însoțite de eliberarea de enzime intracelulare în fluidele corpului. Diagnosticul enzimatic se bazează pe determinarea unui număr de enzime eliberate din celulele organelor afectate și care nu sunt caracteristice serului sanguin.Studiile asupra nefronului uman și animal au arătat că în părțile sale individuale există o diferențiere enzimatică ridicată, strâns legată de funcțiile pe care le îndeplinește fiecare secțiune. Glomerulii rinichilor conțin cantități relativ mici de diferite enzime.
Celulele tubilor renali, în special părțile proximale, conțin cantitatea maximă de enzime. Activitatea lor ridicată se observă în ansa lui Henle, tubii drepti și canalele colectoare. Modificările în activitatea enzimelor individuale în diferite boli de rinichi depind de natura, severitatea și localizarea procesului. Ele sunt observate înainte de apariția modificărilor morfologice la nivelul rinichilor. Întrucât conținutul diferitelor enzime este clar localizat în nefron, determinarea uneia sau alteia enzime în urină poate contribui la diagnosticul local al procesului patologic din rinichi (glomeruli, tubuli, cortex sau medular), diagnosticul diferențial al boli renale și determinarea dinamicii (atenuarea și exacerbarea) procesului în parenchimul renal.
Pentru diagnosticul diferențial al bolilor sistemului genito-urinar, se utilizează determinarea activității următoarelor enzime în sânge și urină: lactat dehidrogenază (LDH), leucină aminopeptidază (LAP), fosfatază acidă (AP), fosfatază alcalină (ALP) , β-glucuronidază, glutamin-oxaloacetic transaminaza (GAST), aldolaza, transamidinaza etc. Activitatea enzimelor din serul sanguin și urină se determină prin metode biochimice, spectrofotometrice, cromatografice, fluorimetrice și chemiluminiscente.
Enzimuria în bolile de rinichi este mai pronunțată și mai naturală decât enzima. Este deosebit de pronunțată în stadiul acut al bolii (pielonefrită acută, traumatisme, dezintegrare tumorală, infarct renal etc.). În aceste boli, este detectată activitate ridicată a transamidinazei, LDH, ALP și CP, hialuronidazei, LAP, precum și a unor enzime nespecifice precum GSH, catalaza [Polyantseva L.R., 1972].
Localizarea selectivă a enzimelor în nefron la detectarea PAP și a fosfatazei alcaline în urină ne permite să vorbim cu încredere despre bolile renale acute și cronice (insuficiență renală acută, necroza tubulilor renali, glomerulonefrita cronică) [Shemetov V.D., 1968]. Potrivit lui A.A. Karelin și L.R. Polyantseva (1965), transamidinaza este conținută în doar două organe - rinichi și pancreas. Este o enzimă mitocondrială a rinichilor și, în mod normal, este absentă în sânge și urină. În diferite boli de rinichi, transamidinaza apare în sânge și urină, iar în cazurile de afectare a pancreasului - numai în sânge.
Krotkiewski (1963) consideră că activitatea fosfatazei alcaline în urină este un test diferențial în diagnosticul glomerulonefritei și pielonefritei, a căror creștere este mai tipică pentru pielonefrita și glomeruloscleroza diabetică decât pentru nefrita acută și cronică. Amilazemia care crește în dinamică cu o scădere simultană a amilazuriei poate indica nefroscleroza și contracția rinichiului; PAP este de cea mai mare importanță în modificările patologice ale glomeruli și tubilor contorți ai rinichiului, deoarece conținutul său în aceste părți ale nefronului este mai mare [Shepotinovsky] V.P. şi colab., 1980]. Pentru a diagnostica nefrita lupică, se recomandă determinarea β-glucuronidazei și CP [Privalenko M.N. şi colab., 1974].
Atunci când se evaluează rolul enzimuriei în diagnosticul bolilor de rinichi, trebuie luate în considerare următoarele puncte. Enzimele, fiind proteine în natură, cu greutate moleculară mică pot trece prin glomeruli intacți, determinând așa-numita enzimă fiziologică. Printre aceste enzime, α-amilaza (greutate moleculară relativă 45.000) și uropepsina (greutatea moleculară relativă 38.000) sunt detectate în mod constant în urină.
Alături de enzimele cu greutate moleculară mică, alte enzime pot fi găsite în concentrații mici în urina indivizilor sănătoși: LDH, aspartat și alanin aminotransferaze, ALP și CP, maltază, aldolază, lipază, diverse proteaze și peptidaze, sulfatază, catalază, ribonuclează, peroxidază.
Enzimele cu greutate moleculară mare cu o greutate moleculară relativă mai mare de 70.000-100.000, conform lui Richterich (1958) și Hess (1962), pot pătrunde în urină numai dacă permeabilitatea filtrului glomerular este afectată. Conținutul normal de enzime în urină nu ne permite să excludem un proces patologic în rinichi din cauza ocluziei ureterului. Cu epzimurie, enzimele pot fi eliberate nu numai din rinichii înșiși, ci și din alte organe parenchimatoase, celule ale membranelor mucoase ale tractului urinar, glandei prostatei, precum și elemente formate de urină în hematurie sau leucociturie.
Majoritatea enzimelor nu sunt specifice rinichilor, așa că este dificil de determinat de unde provin enzimele găsite în urina persoanelor sănătoase și bolnave. Cu toate acestea, gradul de enzimurie, chiar și pentru enzimele nespecifice în afectarea rinichilor, este mai mare decât cel normal sau cel observat în bolile altor organe. Informații mai valoroase pot fi furnizate printr-un studiu cuprinzător al dinamicii unui număr de enzime, în special a celor specifice unui organ, cum ar fi transaminaza.
În rezolvarea problemei originii renale a enzimei în urină ajută studiul izoenzimelor cu identificarea fracțiilor tipice organului studiat. Izoenzimele sunt enzime care au acțiune izogenă (catalizează aceeași reacție), dar eterogene ca structură chimică și alte proprietăți. Fiecare țesut are un spectru izoenzimic caracteristic. Metodele valoroase pentru separarea izoenzimelor sunt electroforeza pe gel de amidon și poliacrilamidă, precum și cromatografia cu schimb ionic.
Proteina Bence Jones
În mielomul multiplu și macroglobulinemia Waldenström, proteina Bence-Jones este detectată în urină. Metoda de detectare a proteinei numite în urină se bazează pe reacția de termoprecipitare. Metodele utilizate anterior care evaluează dizolvarea acestei proteine la o temperatură de 100 ° C și re-precipitarea la răcirea ulterioară sunt nesigure, deoarece nu toate corpurile proteice Bence-Jones au proprietățile corespunzătoare.Este mai sigură detectarea acestei paraproteine prin precipitarea ei la o temperatură de 40 -60 °C. Cu toate acestea, chiar și în aceste condiții, precipitațiile pot să nu apară la prea acide (pH< 3,0—3,5) или слишком щелочной (рН >6.5) urină, cu TPR scăzut și concentrație scăzută de proteină Bence-Jones. Condițiile cele mai favorabile pentru precipitarea acestuia sunt asigurate de metoda propusă de Patnem: 4 ml de urină filtrată se amestecă cu 1 ml de tampon acetat 2 M pH 4,9 și se încălzește timp de 15 minute într-o baie de apă la o temperatură de 56 ° C. În prezența proteinei Bence Jones, în primele 2 minute apare un precipitat pronunțat.
Dacă concentrația de proteină Bence Jones este mai mică de 3 g/l, testul poate fi negativ, dar în practică acest lucru este extrem de rar, deoarece concentrația sa în urină este de obicei mai semnificativă. Nu se poate baza complet pe testele de fierbere. Cu deplină certitudine, poate fi detectat în urină prin metoda imuno-electroforetică folosind seruri specifice împotriva lanțurilor grele și ușoare ale imunoglobulinelor.
Soluții: soluție de azot 50% sau soluție de larion. Procedura de determinare: un rând de eprubete se așează într-un suport și se toarnă 1 ml soluție de azot, se adaugă 1 ml de urină, se stratifică pe reactiv și se notează timpul; când apare un inel, înregistrăm timpul apariției inelului. . Dacă inelul este larg, diluați urina.
4. Determinarea concentrației proteice în urină cu acid sulfosalicilic 3%.
Soluții: 3% CK, clorură de sodiu 9%, soluție de albumină 10%.Procedura de determinare: 1,25 ml de urină limpede se pun în două tuburi centrifuge de măsurare „O” - experiment și „K” - control. Se adaugă 3,75 ml soluție de acid sulfosalicilic 3% la cea experimentală și 3,75 ml soluție de clorură de sodiu 0,9% la cea martor. Se lasă 5 minute, apoi se fotometrajează pe FEC la o lungime de undă de 590 - 650 nm (filtru portocaliu sau roșu) într-o cuvă cu grosimea stratului de 5 mm, experiment versus control. Calculul se efectuează conform programului sau tabelului de calibrare. Principiul metodei se bazează pe faptul că proteina cu acid sulfosalicilic produce turbiditate, a cărei intensitate este direct proporțională cu concentrația proteinei.
5. depistarea glucozei în urină testul Gaines-Akimov. Principiu: Glucoza, atunci când este încălzită într-un mediu alcalin, reduce dihidroxidul de cupru (galben) la monohidroxid de cupru (portocaliu-roșu). Prepararea reactivului: 1) 13,3 g substanță chimică. sulfat de cupru cristalin pur (CuSO4 . 5 H 2 O) soluţie. în 400 ml apă. 2) 50 g hidroxid de sodiu se dizolvă în 400 ml apă. 3) 15 g de glicerină pură se diluează în 200 ml de apă. Se amestecă prima și a doua soluție și se adaugă imediat pe a treia. Rafturi de reactivi. Progresul hotărârii: Adăugați 1 picătură de urină și 9 picături de reactiv într-o eprubetă și fierbeți într-o baie de apă timp de 1-2 minute. Test pozitiv: culoarea galbenă sau portocalie a lichidului sau a sedimentului.
6. Determinarea calitativă a glucozei în urină prin metoda glucozooxidazei. Principiul metodei: glucoza se oxidează în prezenţa glucozoxidazei, conform reacţiei: Glucoză + O 2 gliconolantom + H 2 O 2. Peroxidul H rezultat sub acţiunea peroxidazei oxidează substratul formând un produs colorat.
Adăugați și incubați timp de 15 minute la 37 0 C. Uitați-vă la cuva CPK, de 5 mm.
Apoi calculele se fac folosind formula: C op = Ext op . Cst/ Ect st.
7. Detectarea corpilor cetonici în urină prin testul Lestrade. Pe o lamă de sticlă (la vârful bisturiului) se aplică o pulbere sau o tabletă de soluție Lestrade, iar pe aceasta se aplică 2-3 picături de urină. Dacă sunt prezenți corpi cetonici, va apărea o culoare roz până la violet. Proba este evaluată pe un fundal alb.
8. Detectarea pigmentului sanguin în urină prin testarea cu o soluție alcoolică de amidopirină 5%.
1,5% soluție alcoolică de amidopirină (0,5 g amidopirină se dizolvă în 10 ml alcool 96%) 2,3% soluție peroxid de hidrogen 1,5 g hidropirită se dizolvă în 50 ml apă) Procedura: se toarnă 2-3 ml acid acetic într-o eprubetă - extract eteric sau urină nefiltrată agitată.adăugați 8-10 picături de soluție de amidopirină 5% și 8-10 picături de soluție de peroxid de hidrogen 3%; luați în considerare rezultatul nu mai târziu de 2-3 minute. Testul este considerat pozitiv dacă există o colorare gri-violet.
Detectarea urobilinei în urină prin testul Neubauer.
Se bazează pe reacția de culoare a urobilinogenului cu reactivul Ehrlich, care constă din 2 g paradimetilaminobenaldehidă și 100 ml soluție de acid clorhidric (200 g l) Procedura de determinare: Câteva picături de soluție Ehrlich se adaugă la câțiva ml de urină proaspăt excretată. (pe 1 ml de urină și la 1 ml de soluție. Apariția unei culori roșii în primele 30 de secunde indică o creștere a urobilinogenului. În mod normal, culoarea apare mai târziu sau este absentă cu totul. Când urina stă, urobilinogenul se transformă în urobilină și proba poate fi fals negativă.Proba nu poate fi încălzită, deoarece se pot forma compuși complecși laterali ai aldehidei cu porfirine, indol și medicamente.
Detectarea bilirubinei în urină prin testul Rosin.
Soluție alcoolică de iod (10 g.l): 1 g de iod cristalin se dizolvă într-un cilindru cu o capacitate de 100 ml în 20-30 ml de 96 g de alcool rectificat, apoi se adaugă cu alcool la semn.Procedura de determinare.Se toarnă într-o eprubetă chimică 4-5 ml de urină de testat și așezați cu atenție o soluție de alcool de iod pe ea (dacă urina are o densitate relativă scăzută, atunci ar trebui să fie stratificată pe o soluție de alcool de iod). Dacă există bilirubină la limita dintre lichide, va exista un inel verde (atunci când se ia antipirină, precum și când există sifon în urină, testul de pigmentare a sângelui se dovedește a fi pozitiv).La o persoană sănătoasă, acest test este negativ.
Examinarea urinei prin metoda chimiei uscate (monopolitestele).
Principiu. Metoda se bazează pe efectul pe care o proteină îl are asupra culorii unui indicator într-o soluție tampon, în urma căruia colorantul își schimbă culoarea de la galben la albastru.
Când se efectuează o reacție pentru prezența proteinei în urină și se determină pH-ul folosind hârtie indicator, se recomandă să urmați următoarele instrucțiuni:
- Colectați urina în vase bine spălate.
- Utilizați urină proaspăt colectată, fără conservanți.
- Închideți cu atenție cutia de creion după ce ați îndepărtat numărul necesar de benzi de hârtie indicatoare din ea.
- Nu atingeți zonele indicatoare cu degetele.
- Utilizați numai în termenul de valabilitate indicat pe etichetă.
- Urmați regulile de depozitare a hârtiei indicatoare.
- Evaluați rezultatele în conformitate cu instrucțiunile din instrucțiuni.
Efectuarea unui test de urină folosind un analizor de chimie uscată de urină.
Progresul hotărârii. O fâșie de hârtie indicatoare este scoasă din cutia de creion și scufundată în urina testată pentru a uda simultan ambele zone indicator. După 2-3 secunde, banda se așează pe o placă de sticlă albă. Evaluați imediat pH-ul folosind scala de culori de pe cutia de creion. Valoarea pH-ului pe scara de culori corespunde la 6,0 (sau mai puțin); 7,0; 8,0; 9,0.
Pregătirea urinei, pregătirea preparatelor din sedimentul urinar pentru examinare microscopică într-un mod aproximativ.
Examinarea microscopică a sedimentului urinar se efectuează folosind o metodă orientativă pentru analiza generală și numărarea cantitativă a elementelor formate pentru o evaluare mai precisă a gradului de luicociturie și hematurie.
Reguli pentru pregătirea sedimentului urinar pentru microscopie.
Prima porțiune de dimineață de urină este supusă examinării microscopice.
După amestecare prealabilă, se prelevează 10 ml de urină și se centrifughează timp de 10 minute la 1500 rpm.
Apoi tubul de centrifugare cu urină este răsturnat cu o mișcare ascuțită, iar lichidul supernatant este rapid turnat într-un borcan gol.
Se amestecă, se așează o picătură pe o lamă de sticlă și se acoperă cu grijă cu o lamă.
Dacă sedimentul este format din mai multe straturi, atunci pregătiți un preparat, apoi centrifugeți din nou și pregătiți preparatele din fiecare strat separat.
Dacă nu există sediment vizibil pentru ochi, o picătură de urină este aplicată pe o lamă de sticlă și examinată la microscop.
Mai întâi, materialul este examinat la o mărire mică (ocularul 7-10, obiectivul 8), condensatorul este coborât, deschiderea este ușor îngustată, apoi specimenul este studiat în detaliu la mărire mare (ocularul 10.7; obiectivul 40).
14.Studiul cantitativ al sedimentului urinar conform lui Nechiporenko.
Metoda este utilizată pentru procese inflamatorii latente, lente (pielonefrită, glomerulonefrită), piurie latentă. Pentru a studia procesul patologic în dinamică. Pentru a evalua eficacitatea tratamentului. Avantajele metodei: simplu din punct de vedere tehnic, nu necesită o cantitate mare de urină și este de lungă durată. depozitarea acestuia este utilizată în practica ambulatorie. Obligaţie conditii: urină de dimineață, porție medie, soluție acidă (în urina alcalină poate exista dezintegrarea parțială a elementelor celulare). 1. Amestecați urina 2. Puneți 10 ml de urină într-un tub de centrifugă de măsurare și centrifugați timp de 10 minute la 1500 rpm. 3. După centrifugare. supt Pipetează partea superioară a lichidului, lăsând. exact 1 ml de sediment. 4. Sedimentul este bine amestecat și camera lui Goryaev este umplută. 5. La 3-5 minute după umplere, începeți numărarea elementelor formate. 6. Numărarea leucocitelor, Er, cilindri cu ocular 15, lentilă 8 cu omisiune. condensator, în 100 de camere pătrate mari. Leucocitele, Er sunt numărate separat, cilindrii (se numără cel puțin 4 camere Goryaev) și mediul este îndepărtat. arif. X=A x 0,25x 106/l. Normă: leuk. 2-4x 10 6 /l, Er până la 1 x 10 6 /l, cilindri până la 0,02 x 10 6 /l (una pentru 4 camere). La copii: leucemie. până la 2-4x 10 6 /l, Er până la 0,75 x 10 6 /l, butelii până la 0,02 x 10 6 /l.
15. Examinarea urinei conform lui Zimnitsky
Acest test determină capacitatea rinichilor de a se concentra. si dilueaza urina. Esența sigiliului eșantionului. în determinarea dinamică a densităţii relative şi cantităţii de urină în porţiuni de trei ore pe parcursul zilei. Efectuarea testului: după golirea vezicii urinare la ora 6 a.m. în toaletă, pacientul colectează urina în borcane separate la fiecare trei ore în timpul zilei. Total 8 portii. Progresul cercetării: 1. Livrare. Urina se plasează pe oră și se determină cantitatea și densitatea relativă în fiecare porție. 2. Comparați cantitatea zilnică de urină și cantitatea de lichid băut pentru a determina. % din excreția sa. 3. Calculați diureza de zi și de noapte, rezumați-o și obțineți diureza zilnică. 4. Setați intervalul de fluctuații în cantitate și relativă. densitatea urinei pe zi, adică care este diferența dintre cea mai mică porțiune și cea mai mare. Spectacol. mostre de la oameni sănătoși persoane: 1. Diureză zilnică 800-1500 ml. 2. Diureza de zi prevalează semnificativ asupra diurezei de noapte. 3. Sunt semnificative fluctuațiile volumului de urină în porții individuale (de la 50 la 400 ml). 4. Fluctuațiile p de la 1,003 la 1,028, ar trebui să fie mai mari de 0,008. Cu functie insuficiență renală: hipostenurie, hipoizostenurie, izostenurie, hiperstenurie, oligurie, anurie, nicturie.
16. Descrierea proprietăților generale ale fecalelor.
În mod normal, fecalele constau din produși de secreție și excreție ai tractului digestiv, reziduuri alimentare nedigerate sau parțial digerate și flora microbiană. Cantitatea de fecale este de 100-150 g. Consistența este densă. Forma este cilindrică. Mirosul este normal. Culoarea maro. R-tion - neutru, ușor alcalin sau ușor acid (pH 6,5-7,0-7,5). Mucus-absent. Sânge absent. Nu există resturi de alimente nedigerate.
Proteine în urină: metode de determinare
Proteinurie patologică este unul dintre cele mai importante și permanente semne ale bolilor renale și ale tractului urinar. Determinarea concentrației proteinelor în urină este un element obligatoriu și important al testării urinei. Identificarea și evaluarea cantitativă a proteinuriei este importantă nu numai în diagnosticul multor boli renale primare și secundare; evaluarea modificărilor severității proteinuriei în timp oferă informații despre cursul procesului patologic și eficacitatea tratamentului. Detectarea proteinelor în urină, chiar și în urme, ar trebui să ridice semnale roșii pentru posibile boli ale rinichilor sau ale tractului urinar și să necesite teste repetate. De remarcat în mod deosebit este inutilitatea examinării urinei și, în special, determinarea proteinei din urină fără respectarea tuturor reguli de colectare a acestuia.
Toate metodele pentru determinarea proteinelor în urină pot fi împărțite în:
Calitate superioară,
semi-cantitative,
Cantitativ.
Metode calitative
Toate teste calitative pentru proteinele din urină bazată pe capacitatea proteinelor de a se denatura sub influența diverșilor factori fizici și chimici. Dacă proteina este prezentă în proba de urină testată, apare fie turbiditate, fie sediment floculant.
Condiții pentru determinarea proteinelor în urină pe baza reacției de coagulare:
Urina trebuie să fie acidă. Urina alcalina se aciduleaza cu cateva (2 - 3) picaturi de acid acetic (5 - 10%).
Urina trebuie să fie limpede. Turul este îndepărtat printr-un filtru de hârtie. Dacă turbiditatea nu dispare, se adaugă talc sau magnezie arsă (aproximativ 1 linguriță la 100 ml de urină), se agită și se filtrează.
Un test calitativ trebuie efectuat în două eprubete, una dintre ele fiind una de control.
Ar trebui să căutați ceață pe un fundal negru în lumină transmisă.
Metodele calitative pentru determinarea proteinelor în urină includ:
Testul inelului Heller,
test cu 15 – 20% acid sulfosalicilic,
test de fierbere și altele.
După cum arată numeroase studii, niciuna din numărul mare de metode cunoscute pentru determinarea calitativă a proteinelor în urină nu permite obținerea de rezultate fiabile și reproductibile. În ciuda acestui fapt, în majoritatea DDL-urilor din Rusia, aceste metode sunt utilizate pe scară largă ca screening - în urină cu o reacție calitativă pozitivă, se efectuează ulterior o determinare cantitativă a proteinei. Dintre reacțiile calitative, cel mai des se folosesc testul Heller și testul cu acid sulfosalicilic, dar testul cu acid sulfosalicilic este în general considerat cel mai potrivit pentru identificarea proteinuriei patologice. În prezent, testul de fierbere nu este utilizat practic din cauza intensității și duratei sale de muncă.
Metode semi-cantitative
LA metode semi-cantitative raporta:
Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov,
determinarea proteinelor în urină cu ajutorul benzilor de test de diagnostic.
Metoda Brandberg-Roberts-Stolnikov se bazează pe testul inel Heller, deci cu această metodă se observă aceleași erori ca și la testul Heller.
În prezent, benzile de diagnosticare sunt din ce în ce mai folosite pentru determinarea proteinelor din urină. Pentru determinarea semicantitativă a proteinei în urină pe o bandă, colorantul albastru de bromofenol în tampon de citrat este cel mai adesea utilizat ca indicator. Conținutul de proteine din urină este judecat după intensitatea culorii albastru-verde care se dezvoltă după contactul zonei de reacție cu urina. Rezultatul este evaluat vizual sau folosind analizoare de urină. În ciuda popularității mari și a avantajelor evidente ale metodelor de chimie uscată (simplitate, viteza de analiză), aceste metode de analiză a urinei în general și de determinare a proteinelor în special nu sunt lipsite de dezavantaje serioase. Una dintre ele, care duce la denaturarea informațiilor de diagnostic, este sensibilitatea mai mare a indicatorului albastru de bromofenol la albumină, comparativ cu alte proteine. În acest sens, benzile de testare sunt adaptate în principal pentru a detecta proteinuria glomerulară selectivă, când aproape toată proteina din urină este albumină. Odată cu progresia modificărilor și trecerea proteinuriei glomerulare selective la neselectivă (apariția globulinelor în urină), rezultatele determinării proteinelor se dovedesc a fi subestimate în comparație cu valorile adevărate. Acest fapt nu face posibilă utilizarea acestei metode pentru determinarea proteinelor în urină pentru a evalua starea rinichilor (filtru glomerular) în timp. În cazul proteinuriei tubulare, rezultatele determinării proteinelor sunt, de asemenea, subestimate. Testarea proteinelor cu benzi de testare nu este un indicator de încredere al nivelurilor scăzute de proteinurie (cele mai multe benzi de testare disponibile în prezent nu sunt capabile să detecteze concentrații de proteine urinare mai mici de 0,15 g/L). Rezultatele negative ale determinării proteinelor pe benzi nu exclud prezența globulinelor, hemoglobinei, uromucoidului, proteinei Bence Jones și a altor paraproteine în urină.
Fulgii de mucus cu un conținut ridicat de glicoproteine (de exemplu, în timpul proceselor inflamatorii în tractul urinar, piurie, bacteriurie) se pot așeza pe zona indicatoare a benzii și pot duce la rezultate fals pozitive. Rezultatele fals pozitive se pot datora și concentrațiilor mari uree. Iluminarea slabă și vederea afectată a culorilor pot cauza rezultate inexacte.
În acest sens, utilizarea benzilor de diagnostic ar trebui să se limiteze la procedurile de screening, iar rezultatele obținute cu ajutorul lor trebuie considerate doar orientative.
Metode cantitative
Corect determinarea cantitativă a proteinei în urină în unele cazuri se dovedește a fi o sarcină dificilă. Dificultățile de rezolvare sunt determinate de următorul număr de factori:
prezența în urină a multor compuși care pot interfera cu cursul reacțiilor chimice;
fluctuații semnificative ale conținutului și compoziției proteinelor urinare în diferite boli, ceea ce face dificilă selectarea unui material de calibrare adecvat.
În laboratoarele clinice se folosesc în principal așa-numitele metode „de rutină” pentru determinarea proteinelor în urină, dar nu întotdeauna oferă rezultate satisfăcătoare.
Din punctul de vedere al unui analist de laborator, o metodă destinată determinării cantitative a proteinelor în urină trebuie să îndeplinească următoarele cerințe:
au o relație liniară între absorbția complexului format în timpul reacției chimice și conținutul de proteine din probă pe o gamă largă de concentrații, ceea ce va evita operațiuni suplimentare la pregătirea probei pentru cercetare;
ar trebui să fie simplu, să nu necesite calificări înalte ale interpretului și să fie efectuat cu un număr mic de operații;
au sensibilitate ridicată și fiabilitate analitică atunci când se utilizează volume mici de material de testat;
să fie rezistent la diverși factori (fluctuații în compoziția probei, prezența medicamentelor etc.);
au un cost acceptabil;
să fie ușor de adaptat la autoanalizoare;
rezultatul determinării nu trebuie să depindă de compoziția proteică a probei de urină testată.
Niciuna dintre metodele cunoscute în prezent pentru determinarea cantitativă a proteinei în urină nu poate pretinde pe deplin a fi „standardul de aur”.
Metodele cantitative pentru determinarea proteinelor în urină pot fi împărțite în turbidimetrice și colorimetrice.
Metode turbidimetrice
Metodele turbidimetrice includ:
determinarea proteinelor cu acid sulfosalicilic (SSA),
determinarea proteinelor cu acid tricloracetic (TCA),
determinarea proteinei cu clorură de benzetoniu.
Metodele turbidimetrice se bazează pe o scădere a solubilității proteinelor din urină datorită formării unei suspensii de particule în suspensie sub influența agenților de precipitare. Conținutul de proteine din proba de testat se apreciază fie după intensitatea împrăștierii luminii, determinată de numărul de particule care împrăștie lumina (metoda nefelometrică de analiză), fie prin atenuarea fluxului luminos prin suspensia rezultată (metoda turbidimetrică de analiză). ).
Cantitatea de împrăștiere a luminii în metodele de precipitare pentru detectarea proteinelor în urină depinde de mulți factori: viteza de amestecare a reactivilor, temperatura amestecului de reacție, valoarea pH-ului mediului, prezența compușilor străini și metodele fotometrice. Respectarea atentă la condițiile de reacție va duce la formarea unei suspensii stabile cu o dimensiune constantă a particulelor și rezultate relativ reproductibile.
Unele medicamente afectează rezultatele metodelor turbidimetrice pentru determinarea proteinelor în urină, ducând la așa-numitele rezultate „fals pozitive” sau „fals negative”. Acestea includ unele antibiotice (benzilpenicilină, cloxacilină etc.), substanțe care conțin iod radio-contrast, medicamente sulfonamide.
Metodele turbidimetrice sunt greu de standardizat și conduc adesea la rezultate eronate, dar, în ciuda acestui fapt, ele sunt utilizate în prezent pe scară largă în laboratoare datorită costului scăzut și disponibilității reactivilor. Cea mai utilizată metodă în Rusia pentru determinarea proteinelor este acidul sulfosalicilic.
Metode colorimetrice
Cele mai sensibile și precise sunt metodele colorimetrice pentru determinarea proteinelor totale din urină, bazate pe reacții de culoare specifice ale proteinelor.
Acestea includ:
reacție la biuret,
metoda Lowry,
metode bazate pe capacitatea diverșilor coloranți de a forma complexe cu proteine:
Ponceau S,
Coomassie Brilliant Blue
roșu pirogallol.
Din punctul de vedere al interpretului, în munca zilnică a laboratorului cu un flux mare de cercetare, metoda biuretului este incomodă din cauza numărului mare de operații. În același timp, metoda se caracterizează printr-o fiabilitate analitică ridicată, permite determinarea proteinelor într-o gamă largă de concentrații și detectarea albuminei, globulinelor și paraproteinelor cu sensibilitate comparabilă, drept urmare metoda biuretului este considerată un referință și este recomandată pentru compararea altor metode analitice pentru detectarea proteinelor în urină. Metoda biuretului pentru determinarea proteinelor în urină se efectuează de preferință în laboratoarele care deservesc secțiile de nefrologie și este utilizată în cazurile în care rezultatele determinării prin alte metode sunt discutabile, precum și pentru a determina cantitatea de pierdere zilnică de proteine la pacienții cu nefrologie.
Metoda Lowry, care este mai sensibilă decât metoda biuretului, combină reacția biuretului și reacția Folin la aminoacizii tirozină și triptofan din molecula proteică. În ciuda sensibilității sale ridicate, această metodă nu oferă întotdeauna rezultate fiabile la determinarea conținutului de proteine în urină. Motivul pentru aceasta este interacțiunea nespecifică a reactivului Folin cu componentele neproteice ale urinei (cel mai adesea aminoacizi, acid uric, carbohidrați). Separarea acestor și a altor componente ale urinei prin dializă sau precipitare a proteinelor permite utilizarea cu succes a acestei metode pentru determinarea cantitativă a proteinei în urină. Unele medicamente - salicilații, clorpromazina, tetraciclinele pot afecta această metodă și pot distorsiona rezultatele studiului.
Sensibilitatea suficientă, reproductibilitatea bună și ușurința determinării proteinelor prin legarea coloranților fac ca aceste metode să fie promițătoare, dar costul ridicat al reactivilor împiedică utilizarea lor mai largă în laboratoare. În prezent, metoda cu roșu pirogalol devine din ce în ce mai răspândită în Rusia.
Când efectuați un studiu al nivelului de proteinurie, trebuie să rețineți că diferitele metode de determinare a proteinuriei au sensibilitate și specificitate diferite pentru numeroase proteine urinice.
Pe baza datelor empirice, se recomandă determinarea proteinei prin două metode diferite și calcularea valorii adevărate folosind una dintre următoarele formule: proteinurie = 0,4799 B + 0,5230 L; proteinurie = 1,5484 B – 0,4825 S; proteinurie = 0,2167 S + 0,7579 L; proteinurie = 1,0748 P – 0,0986 B; proteinurie = 1,0104 P – 0,0289 S; proteinurie = 0,8959 P + 0,0845 L; unde B este rezultatul măsurării cu Coomassie G-250; L - rezultatul măsurării cu reactiv Lowry; P este rezultatul măsurării cu pirogalol molibdat; S este rezultatul măsurării cu acid sulfosalicilic.
Ținând cont de fluctuațiile pronunțate ale nivelului de proteinurie în diferite momente ale zilei, precum și de dependența concentrației de proteine din urină de diureză, conținutul său diferit în porțiuni individuale de urină, în prezent, în caz de patologie renală , se obișnuiește să se evalueze severitatea proteinuriei prin pierderea zilnică de proteine în urină, adică să se determine așa-numita proteinurie zilnică. Se exprimă în g/zi.
Dacă este imposibilă colectarea zilnică a urinei, se recomandă determinarea concentrațiilor de proteine și creatinine într-o singură porție de urină. Deoarece rata de excreție a creatininei este destul de constantă pe parcursul zilei și nu este afectată de modificările ratei de debit de urină, raportul dintre concentrația de proteine și concentrația de creatinine este constant. Acest raport se corelează bine cu excreția zilnică de proteine și, prin urmare, poate fi utilizat pentru a evalua severitatea proteinuriei. În mod normal, raportul proteină/creatinină ar trebui să fie mai mic de 0,2. Proteinele și creatinina sunt măsurate în g/l. Un avantaj important al metodei de evaluare a severității proteinuriei folosind raportul proteină-creatinină este eliminarea completă a erorilor asociate cu imposibilitatea sau colectarea incompletă a urinei de 24 de ore.
Literatură:
O. V. Novoselova, M. B. Pyatigorskaya, Yu. E. Mikhailov, „Aspecte clinice ale identificării și evaluării proteinuriei”, Manualul șefului laboratorului clinic, nr. 1, ianuarie 2007.
A. V. Kozlov, „Proteinuria: metode pentru detectarea ei”, prelegere, Sankt Petersburg, SPbMAPO, 2000.
V. L. Emanuel, „Diagnosticul de laborator al bolilor de rinichi. Sindromul urinar,” - Directorul șefului laboratorului clinic, nr. 12, decembrie 2006.
IN SI. Pupkova, L.M. Prasolova - Metode pentru determinarea proteinelor în urină (revizuire a datelor din literatură)
Manual de Metode de Laborator Clinic. Ed. E. A. Kost. Moscova, „Medicina”, 197
Teste calitative pentru determinarea proteinelor în urină
Au fost propuse peste 100 de reacții pentru determinarea calitativă a proteinei în urină. Cele mai multe dintre ele se bazează pe precipitarea proteinelor prin mijloace fizice (încălzire) sau chimice. Prezența proteinelor este confirmată de apariția turbidității.
Probele uscate colorimetrice sunt de asemenea de interes.
Doar cele mai importante teste pentru practică vor fi descrise mai jos.
Testați cu acid sulfosalicilic. La câțiva mililitri de urină adăugați 2-4 picături dintr-o soluție 20% de acid sulfosalicilic. Dacă reacția este pozitivă, apare turbiditatea. Rezultatul este desemnat prin termenii: opalescență, reacție slab pozitivă, pozitivă sau puternic pozitivă. Testul acidului sulfosalicilic este unul dintre cele mai sensibile teste pentru detectarea proteinelor în urină. Detectează chiar și cele mai minore creșteri patologice ale proteinelor din urină. Datorită tehnicii sale simple, acest test a găsit o aplicare largă.
Testați cu aseptol. Aseptol este un înlocuitor al acidului sulfosalicilic. Poate fi preparat din materiale disponibile în orice laborator (fenol și acid sulfuric). Ca reactiv se folosește o soluție de Aseptol 20%. Testul se efectuează după cum urmează: într-o eprubetă care conține 2-3 ml de urină, se adaugă 0,5-1 ml soluție de aseptol pe fund. Dacă la interfața dintre cele două lichide apare un inel alb de proteină coagulată, proba este pozitivă.
Testul lui Heller. Sub câțiva mililitri de urină adăugați 1-2 ml de acid azotic 30% (gravitate specifică 1,20). Dacă la marginea ambelor lichide apare un inel alb, proba este pozitivă. Reacția devine pozitivă dacă conținutul de proteine este mai mare de 3,3 mg%. Uneori se obține un inel alb în prezența unor cantități mari de urati. Spre deosebire de inelul proteic, inelul urat nu apare la limita dintre ambele lichide, ci ușor deasupra. Larionova sugerează utilizarea unei soluții de acid azotic 1% într-o soluție saturată de sare de masă ca reactiv în loc de acid azotic 30%; acest lucru are ca rezultat economii mai mari de acid azotic.
Testați cu sulfură de fier de potasiu și acid acetic. Această reacție face posibilă distingerea proteinelor serice de nucleoalbumine.
Se toarnă cantități egale de urină în două eprubete. La unul dintre ele se adaugă câteva picături dintr-o soluție de acid acetic 30%. Dacă rezultatul este tulbure în comparație cu tubul de control, urina conține nucleoalbumină. Dacă turbiditatea nu apare, conținutul ambelor eprubete este amestecat și din nou împărțit în două părți. Câteva picături (excesul poate transforma un test pozitiv într-un negativ) dintr-o soluție 10% de sare galbenă din sânge (sulfură de fier de potasiu) se adaugă într-una dintre cele două eprubete. In prezenta proteinelor din zer se obtine turbiditatea.
În cazul urinei concentrate care conțin cantități mari de acid uric și urati, se va face un test cu sulfură ferică de potasiu și acid acetic după diluarea preliminară (de 2-3 ori) a urinei cu apă. În caz contrar, pot apărea tulburări din cauza acidului uric sedimentat.
Acest lucru este deosebit de important atunci când se examinează urina sugarilor, care conține mult acid uric și urat.
Dintre celelalte teste calitative pentru proteine în urină, bazate pe precipitarea proteinelor, au fost utilizate următoarele: testul de fierbere, Esbach, Purdy, Roberts, Almen, Balloni, Buro, Claudius, Corso, Dome, Goodmann-Suzanne, Jollet, Teste Exton, Kamlet, Kobuladze, Liliendahl-Petersen, Polacci, Pons, Spiegler, Tanre, Thiele, Brown, Tsushiya etc.
Atunci când se produc eșantioane de înaltă calitate pentru proteine în urină pe baza precipitării proteinelor, trebuie respectate următoarele reguli generale, încălcarea cărora duce la erori semnificative în studiu.
1. Urina testată trebuie să fie acidă. Pentru o reacție alcalină, urina este ușor acidulată cu acid acetic. Producerea unei probe cu urină alcalină în cazurile în care un acid este utilizat ca reactiv poate duce la neutralizarea acidului și la un rezultat negativ într-o reacție pozitivă. Acest lucru este valabil mai ales pentru testul cu acid sulfosalicilic, deoarece acidul este adăugat în cantități foarte mici și poate fi ușor neutralizat.
2. Urina testată trebuie să fie clară.
3. Probele pentru determinarea proteinei în urină trebuie făcute întotdeauna în două eprubete, dintre care una servește drept control. Fără un tub de control, este posibil să nu observați o ușoară turbiditate în timpul reacțiilor.
4. Cantitatea de acid adăugată în timpul testării nu trebuie să fie prea mare. O cantitate mare de acid poate duce la formarea de acidalbumină solubilă și poate transforma o probă pozitivă într-una negativă.
Datorită tehnicii lor simple, probele uscate colorimetrice merită o mare atenție. Aceste teste folosesc efectul pe care îl are proteina asupra culorii indicatorului din soluția tampon (așa-numita eroare proteică a indicatorilor). O fâșie de hârtie de filtru înmuiată în tampon acid de citrat și albastru de bromofenol ca indicator este scufundată pentru scurt timp în urină. Testul este pozitiv dacă culoarea este albastru-verde. Prin compararea intensității culorii cu standardele de hârtie colorată, se pot trage concluzii provizorii și cantitative. Hârtia indicatoare este vândută în ramuri cu standardele de culoare corespunzătoare, asemănătoare cu hârtia indicatoare universală.
Metode de determinare cantitativă a proteinei în urină
Au fost propuse multe metode pentru determinarea cantitativă a proteinei în urină. Metodele cantitative precise pentru determinarea proteinelor din materialul biologic nu au fost utilizate pe scară largă în determinarea proteinelor în urină datorită tehnicilor complexe și care necesită multă muncă. Metodele volumetrice, în special metoda Esbach, au devenit larg răspândite. Sunt foarte simple, dar, din păcate, nu sunt foarte precise. Metodele grupului Brandberg-Stolnikov sunt, de asemenea, convenabile pentru clinică, oferind rezultate mai precise decât metodele volumetrice cu o tehnică relativ simplă. Dacă aveți un fotometru sau un nefelometru, metodele nefelometrice sunt de asemenea convenabile.
metoda Esbach. A fost propusă de medicul parizian Esbach în 1874. Urina și un reactiv sunt turnate într-o eprubetă specială (albuminometrul Esbach). Eprubeta se etanșează cu un dop de cauciuc, se amestecă bine (fără agitare!) și se lasă în poziție verticală până a doua zi. Se numără diviziunea la care ajunge coloana de sediment proteic. Numărul găsit arată conținutul de proteine. Este foarte important cu metoda Esbach ca urina să fie acidă. Urina alcalină poate neutraliza constituenții acizi ai reactivului și poate preveni precipitarea proteinelor.
Avantajele metodei: este simplă și convenabilă în practică.
Dezavantaje: metoda este inexactă, rezultatul se obține în 24 - 48 de ore.
Metoda Brandberg-Stolnikov. Se bazează pe testul calitativ Geller. Testul Heller poate fi utilizat pentru determinarea cantitativă, deoarece dă un rezultat pozitiv atunci când conținutul de proteine este peste 3,3 mg%. Aceasta este concentrația maximă de proteine sub care proba devine negativă.
Modificarea lui Ehrlich și Althausen. Oamenii de știință sovietici S. L. Erlikh și A. Ya. Althauzen au modificat metoda Brandberg-Stolnikov, indicând posibilitățile de simplificare a studiului și de economisire a timpului în producerea acesteia.
Prima simplificare este legată de momentul apariției inelului. Se determină ora exactă a apariției sale, fără a respecta neapărat minutele 2 și 3.
A doua simplificare face posibilă determinarea tipului de diluție care trebuie făcută. Autorii au demonstrat că diluția necesară poate fi determinată aproximativ de aspectul inelului rezultat. Ei deosebesc sub formă de fir, largi
și un inel compact.
Dintre metodele nefelometrice, merită remarcat metoda Kingsberry și Clark. Se toarnă 2,5 ml de urină filtrată într-un cilindru gradat mic și se completează cu o soluție apoasă 3% de acid sulfosalicilic până la 10 ml. Se amestecă bine și după 5 minute fotometrizați într-o cuvă de 1 cm folosind un filtru galben, folosind apă ca lichid de compensare. Cu fotometrul Pulfrich, dispariția constatată, înmulțită cu 2,5, dă cantitatea de proteină în %o. În cazul în care indicele de extincție este peste 1,0, urina este mai întâi diluată de 2 ori, de 4 ori sau chiar mai mult.
Pentru a avea o idee clară asupra cantității de proteine excretate în urină, este necesar să se determine nu numai concentrația acestora într-o porțiune separată de urină, ci și cantitatea lor totală zilnică. Pentru a face acest lucru, colectați urina pacientului timp de 24 de ore, măsurați volumul acesteia în mililitri și determinați concentrația de proteine într-o porțiune de urină zilnică în g%. Cantitatea de proteine excretată în urină în 24 de ore este determinată în funcție de cantitatea zilnică de urină în grame.
Semnificația clinică a proteinei în urină
Urina umană conține în mod normal cantități minime de proteine, care nu pot fi determinate prin teste calitative obișnuite de proteine de urină. Excreția de cantități mari de proteine, la care testele calitative obișnuite pentru proteine în urină devin pozitive, este un fenomen anormal numit proteinurie. Proteinuria este fiziologică doar la nou-născut, în primele 4-10 zile după naștere. Denumirea folosită în mod obișnuit albuminurie este incorectă, deoarece nu numai albuminele sunt excretate în urină, ci și alte tipuri de proteine (globuline etc.).Proteinuria a fost descoperită ca simptom de diagnostic în 1770 de către Cotugno.
Cea mai importantă proteinurie renală funcțională la copii sunt următoarele:
1. Proteinuria fiziologică a nou-născutului. Apare la majoritatea nou-născuților și nu are semnificație adversă. Se explică printr-un filtru renal slab, deteriorarea la naștere sau pierderea de lichide în primele zile de viață. Proteinuria fiziologică dispare în a 4-a-10-a zi după naștere (mai târziu la copiii prematuri). Cantitatea de proteine este mică. Este nucleoalbumina.
Albuminuria neonatală care continuă o lungă perioadă de timp poate fi un simptom al lues congenitale.
2. Albuminurie accident vascular cerebral. Sunt cauzate de depășirea pragului de iritabilitate normală a filtrului renal prin iritații semnificative mecanice, termice, chimice, mentale și de altă natură - pierderi de lichide la sugari (proteinurie de deshidratare), scăldat la rece, hrană bogată în proteine (proteinurie alimentară), palparea rinichiului (albuminurie palpatorie), surmenaj fizic, frică etc.
Albuminuria accidentului vascular cerebral apare mai ușor la copii la o vârstă fragedă decât la copiii mai mari și la adulți, deoarece rinichii sugarului și copilului mic sunt mai ușor iritați. Deshidratare albuminuria (tulburări de hrănire, slăbiciune de lichide, toxicoză, diaree, vărsături) este observată mai ales la sugari.
Albuminuria accidentului vascular cerebral este benignă. Ele dispar imediat după ce sunt eliminate cauzele care le provoacă. Sedimentul conține uneori leucocite unice, ghips și eritrocite. Proteina este cel mai adesea nucleoalbumina.
3. proteinurie ortostatică. Această condiție este tipică pentru copiii de vârstă preșcolară și școlară. Apare din cauza tulburărilor vasomotorii ale aportului de sânge la rinichi. Tipic albuminuriei ortostatice (de unde și denumirea ei) este că apare doar atunci când copilul stă în picioare, când coloana vertebrală este în poziție lordotică. Când este culcat, dispare. Nucleoalbumina este eliberată. În cazuri îndoielnice, puteți recurge la experimentul ortostatic, care constă în următoarele: seara, cu o oră înainte de culcare, copilul golește vezica urinară; Dimineața, când se ridică din pat, eliberează din nou urină. Această urină nu conține proteine. Apoi copilul este asezat in genunchi timp de 15-30 de minute cu un bat la spate, intre coatele indoite ale ambelor maini. Se creează o poziție lordotică, care duce la eliberarea de proteine, fără modificări în sediment.
Cu albuminuria ortostatică, se pot elibera 8-10 g de proteine pe zi.
Proteinuria renală organică are cea mai importantă semnificație clinică dintre toate proteinuriile. Sunt cauzate de boli organice ale rinichilor (nefrita, nefroza, nefroscleroza). Proteinuria este unul dintre cele mai importante și mai cunoscute simptome ale bolii organice de rinichi.
1. În glomerulonefrita acută și cronică, proteinuria apare în mod regulat. Cantitatea de proteine este moderată și nu există o paralelă între gradul de proteinurie și severitatea bolii. Dimpotrivă, nefrita cronică și mai severă apare adesea cu mai puține proteine decât nefrita acută. După nefrita acută, uneori pentru o perioadă lungă de timp (ani), în urină sunt detectate cantități mici de proteine, care nu au semnificație patologică („albuminurie reziduală”). Nu trebuie să uităm că poate apărea și „nefrită fără proteinurie”. Uneori, proteinele se găsesc într-o porțiune de urină, dar nu și în alta. Raportul dintre albumină și globulină în nefrita acută este scăzut, iar în nefrita cronică este mai mare.
2. În nefroscleroză, cantitatea de proteine din urină este foarte mică, se găsesc adesea forme de boală fără proteine în urină.
3. Dintre toate bolile renale, nefroza apare cu proteinuria cea mai severă.
4. În condiții infecțioase și toxice apar așa-numita proteinurie febrilă și toxică. Acestea sunt nefroze acute, în care cantitatea de proteine este mică. Acest grup include și proteinuria în condiții convulsive (convulsii), hiperfuncția glandei tiroide, icter, invaginație, enterocolită, arsuri, anemie severă etc. Aceste albuminurie sunt benigne și trec rapid (albuminurie tranzitorie).
5. Când sângele stagnează în rinichi, apare așa-numita albuminurie congestivă, care este caracteristică pacienților cardiaci în stadiul de decompensare. De asemenea, apare cu ascită și tumori abdominale.
În albuminuria febrilă, toxică și congestivă este deosebit de pronunțată permeabilitatea crescută a filtrului renal. Potrivit unor autori, multe dintre aceste proteinurie apar fără afectarea organică a parenchimului renal.
albuminurie extrarenală sunt de obicei cauzate de impuritățile proteice (secreții, celule degradate), care sunt secretate de tractul urinar și organele genitale bolnave. Albuminuria extrarenală este mai frecventă din cauza cistopielitei (piurie), mai rar din cauza vulvovaginitei, pietrelor și tumorilor tractului urinar.
Cu albuminuria extrarenală, în sediment se găsesc un număr mare de leucocite și bacterii. Elementele rinichilor nu se găsesc aproape niciodată. Cantitatea de proteine este mică. Urina filtrată sau centrifugată nu este de obicei pozitivă pentru proteine.
La cei care se recuperează după pielită, albuminuria dispare după bacteriurie și piurie.
Trebuie subliniat ca fenomen caracteristic faptul că în copilăria timpurie bolile renale organice apar extrem de rar, prin urmare proteinuria organică este și ea rară. Dintre acestea, există mai ales febrile și toxice. Spre deosebire de proteinuria organică, albuminuria accidentului vascular cerebral este foarte frecventă la copii la o vârstă fragedă.
La copiii mai mari, proteinuria organică este mai des funcțională. În general, odată cu vârsta, proteinuria funcțională apare mai rar, iar proteinuria organică mai des.
